Contrato de suministro de reactivos para el establecimiento de cultivos primarios a partir de muestras de tejido tumoral y el mantenimiento de líneas celulares establecidas para el laboratorio de terapias experimentales y nuevos biomarcadores en cáncer, para la Fundación para la Investigación Biomédica del Hospital Universitario La Paz, a adjudicar por procedimiento abierto simplificado mediante pluralidad de criterios. El proyecto PI21/00145 objeto de este contrato está subvencionado por el Instituto De Salud Carlos III (ISCIII) y cofinanciado por la Unión Europea

Proteína humana recombinante SCF (Stem cell factor) producida en células de riñón embrionario humano HEK293 (10ug por unidad de lote). Con una pureza de más del 95%, un nivel de endotoxina <0,10 por 1 μg de la proteína por el test LAL, un peso molecular de 18 KDa y medido en un ensayo de proliferación celular utilizando células eritroleucémicas humanas TF-1, con una ED50 de 1-5 ng/ml. Liofilizado a partir de una solución filtrada de 0,2 μm en PBS y que se reconstruya a partir de 100-500 μg/ml en PBS.

Antibiótico selectivo Blasticidina S HCl (10 mg/ml en HEPES 20 mM) con un intervalo de concentración de trabajo recomendados de entre 1-20 ug/ml dependiendo de la línea celular. Aislado a partir de Streptomyces griseochromogenes con rápida actuación al inhibir la formación de enlaces peptídicos por parte del ribosoma y un potente inhibidor de la síntesis de proteínas tanto en células procariotas como eucariotas. Con 10 viales de 1 ml por unidad de lote. Estéril con filtro y que contenga aditivos Ácido 4-(2-hidroxietil)piperazin-1-iletanosulfónico.

Antibiótico selectivo Geneticin (sulfato G418) con una concentración de 50 mg/ml en agua y un volumen de 20 ml por unidad de lote. Producido por la bacteria Micromonospora rhodorangea. Actúa uniéndose al ribosoma, lo que inhibe la síntesis de proteínas tanto en células procariotas como eucariotas. Se utiliza como antibiótico selectivo en el rango de concentración de 100-200 μg/ml para bacterias, o 200–500 μg/ml para la mayoría de las células de mamíferos. Estéril con filtro.

Medio RPMI 1640 1X con L-glutamina y rojo fenol para cultivos celulares, con niveles bajos de endotoxinas garantizados≤0,025 EU/ml y con un pH desde 7’2 hasta 7’4. Con una cantidad de 6 x 500 ml por unidad de lote.

Solución salina tamponada con fosfato (PBS) 1X con una concentración de 0.0067M, que incluya cloruro de sodio, fosfato de sodio y potasio sin calcio ni magnesio. Sin piruvato de sodio, con un pH entre 7,0 a 7’2 y con un método de esterilización por filtro con un poro de 0,1 μm. Un volumen de 100 ml por unidad de lote.

solución estándar de colágeno tipo I ultrapura derivado de la piel bovina que contiene aproximadamente un 97 %de colágeno tipo I y el resto está compuesto por colágeno tipo III. Contiene un alto contenido de monómero medido mediante cromatografía de permeación en gel, lo que proporciona consistencia y reproducibilidad al producto. Reactivo en formato líquido listo para usar para aplicaciones de cultivo celular. El volumen de esta solución de unos 20 ml por unidad de lote.

Endotoxina del cólera procedente de Vibrio cholerae (≥90% (SDS-PAGE)) que se utiliza como suplemento en medios de cultivo celular de células epiteliales y de tumores primarios. En formato de polvo liofilizado que contiene sales del tampón Tris, cloruro de sodio, acida sódica y EDTA sódica. Con 0’5 mg por unidad de lote y soluble en agua (10 mg/mL).

Endotelina 1 (ET-1) de origen humano y con un análisis de ≥97% (HPLC). Liofilizado a partir de TFA al 0,1% en H2O y soluble en Ácido acético al 1%: >1 mg/ml y H2O : >1 mg/ml. Con una cantidad de 50 microgramos por unidad de lote.

Forbol 12-miristato 13-acetato con un análisis de ≥99% (TLC). Producto en forma de polvo o película y soluble en DMSO y etanol. 1 mg por unidad de lote.

Kit de disociación de tumores desarrollado para la generación rápida y suave de suspensiones unicelulares a partir de tejido tumoral humano. Optimizado para un alto rendimiento de células tumorales y linfocitos infiltrantes de tumores, preservando al mismo tiempo importantes epítopos de la superficie celular. Probado para una amplia gama de tipos de tumores, incluido el cáncer de mama, el cáncer de páncreas, el cáncer de próstata, el cáncer de colon, el adenocarcinoma de pulmón y más. Con un tamaño para 25 preparaciones por unidad de lote, que contenga enzimas liofilizadas para favorecer la digestión de tejidos de un tamaño entre 0.01–1 g.

Filtros con un tamaño de poro de 70 μm que estén diseñados para la fácil eliminación de agregados celulares o partículas grandes después de la disociación del tejido o de muestras de sangre más grandes para obtener suspensiones unicelulares uniformes. Cada unidad consta de 100 filtros en paquetes estériles de 4x25 piezas, que encajan en tubos cónicos estándar de 15 y 50 ml.

Placas de cultivo de células y tejidos estándar, con superficie tratada de 6 pocillos y un fondo plano y placa de fondo redonda, que sean libres de DNA/RNA. Por cada unidad de lote 100 unidades. Esterilizado y apirógeno. Las placas de cultivo de células y tejidos que sean ideales para el crecimiento celular y el rendimiento celular en análisis múltiples, comparativos y de otro tipo. La superficie del pozo sea lisa y libre de estrías para maximizar el área de crecimiento utilizable. Con bordes elevados en los pocillos con anillos uniformes en la tapa para reducir la evaporación. La tapa que sea de una sola posición que reduce los riesgos de contaminación cruzada y los errores de manipulación. Los pocillos que estén etiquetados con un código alfanumérico para una fácil identificación.

Placa multipocillo transparente de 12 pocillos que sea incolora, que este compuesta de poliestireno tratado con TC. Fondo plano, con tapa de baja evaporación, envuelto individualmente, apirógeno, estéril, 50 unidades por unidad de lote. Con un volumen de trabajo del medio es de 1,5 a 2,2 ml y un área celular de 3’8 cm cuadrado.  Que tenga unos diseños de pozo profundo que controlen la contaminación, reduzcan la evaporación y minimicen los efectos de los bordes. Con un tratamiento confiable de cultivo de tejidos con plasma de gas al vacío que proporciona consistencia de pocillo.